转染人类MRP2基因的MDCK细胞是人类肠粘膜的良好模型吗?

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唐福，何丽凯，波夏特RT

转染人类MRP2基因的MDCK细胞是人类肠粘膜的良好模型吗?

Pharm Res. 2002 Jun;19(6):773-9。

PubMed ID

12134946 (在PubMed

］

摘要

目的:研究转染人MRP2基因(MDCK-MRP2)的Madin-Darby犬肾细胞是否为良好的人肠黏膜模型。方法:采用Western blotting方法比较Caco-2细胞中MRP2的表达与mdck -野生型(MDCK-WT)和MDCK-MRP2细胞中该外排转运蛋白的表达。MDCK-MRP2, MDCK-WT中MRP2的极化射流活动。以长春碱为底物，比较转染人MDR1基因的MDCK细胞(MDCK-MDR1)和Caco-2细胞。在抑制p -糖蛋白但不影响MRP2的GF120918 (2 microM)存在的情况下，测定了Caco-2和MDCK-MRP2细胞中长春碱流出的表观Michaelis-Menten常数(K(M)， Vmax)。通过测量已知MRP2底物/抑制剂对长春碱在这些细胞系中的外排的影响，确定其表观抑制常数(K(I))。结果:Western blotting检测MDCK-MRP2细胞表达的MRP2水平高于MDCK-WT和Caco-2细胞。在Caco-2和MDCK细胞中表达的两种MRP2异构体在分子量为150 kD和190 kD时迁移。在MDCK-MRP2细胞中，150kd亚型似乎过表达。MDCK-MRP2细胞单分子层比Caco-2和MDCK-WT细胞单分子层具有更高的长春碱极化流出。 K(M) values for vinblastine in Caco-2 and MDCK-MRP2 cells were determined to be 71.8+/-11.6 and 137.3+/-33.6 microM. respectively, and Vmax values were determined to be (0.54+/-0.03 and 2.45+/-0.31 pmolcm(-2)s(-1), respectively. Known substrates/inhibitors of MRP2 showed differences in their ability to inhibit vinblastine efflux in Caco-2 cells as compared to MDCK-MRP2 cells CONCLUSIONS: These data suggest that MDCK-MRP2 cells overexpress only the 150 kD isoform of MRP2. The 190 kD isoform, which was also found in Caco-2 cells and MDCK-WT cells, was present in MDCK-MRP2 cells but not over expressed. The apparent kinetics constants and affinities of some MRP2 substrates were different in Caco-2 cells and MDCK-MRP2 cells. These differences in substrate activity could result from differences in the relative expression levels of the MRP2 isoforms present in Caco-2 cells and MDCK-MRP2 cells and/or differences in the partitioning of substrates in these two cell membrane bilayers.

引用本文的药库数据

药物转运蛋白

药物	转运体	种类	生物	药理作用	行动
依托泊苷	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂	细节
奎尼丁	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	蛋白质	人类	未知的	抑制剂	细节
利血平	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	蛋白质	人类	未知的	抑制剂	细节
长春花碱	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂 诱导物	细节
长春新碱	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂	细节

绑定属性

药物	目标	财产	测量	pH值	温度(°C)
环孢霉素	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	Ki (nM)	8110	N/A	N/A	细节
依托泊苷	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	Ki (nM)	756000	N/A	N/A	细节
利血平	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	Ki (nM)	295000	N/A	N/A	细节
长春新碱	管状多特异性有机阴离子转运蛋白	Ki (nM)	802000	N/A	N/A	细节