mu-阿片受体过滤试验。快速估计配体的结合亲和力和长效配体-受体复合物的可逆性。
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伊利恩B，加尔兹JL，梅珍A，高尔德纳M，赫斯C
mu-阿片受体过滤试验。快速估计配体的结合亲和力和长效配体-受体复合物的可逆性。
生物化学药物学。1988年10月15日;37(20):3843-51。
- PubMed ID
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2847746 (PubMed视图］
- 摘要
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一种过滤器相关的绑定技术，最初由Leysen和Gommeren [J。受体Res. 4,817 (1984);药物开发第8号决议，119(1986)]的重点是mu-阿片受体位点的研究。3h -舒芬太尼(一种mu选择性放射性配基)有趣的结合特征允许这样的过滤过程进行。它的应用有三方面。5分钟的结合实验使我们能够验证特定的3h -舒芬太尼与过滤吸收的大鼠脑膜的结合具有已知的膜结合mu-阿片受体位点的动力学和平衡结合特性。此外，过滤技术使我们能够快速获得关于未标记化合物从受体位点的解离率的信息。在实践中，用高浓度感冒药预孵育的膜被过滤器吸收。分离是通过在过滤器上反复应用缓冲样品来实现的，并通过自由的特定3h -舒芬太尼结合位点的恢复来监测。最后，通过高离子强度的洗涤缓冲液改进的这种解离过程，被发现比经典的稀释离心过程更有效和更有吸引力，特别是对于缓慢解离的化合物。 Special attention was paid to the discrimination between pseudo-irreversible binding of drugs and stable covalent labelling of mu-opioid receptor sites (either by affinity or photoaffinity probes), particularly when unlabelled ligands were the only tools available.