体外和体内性质的重组人血清白蛋白毕赤酵母属pastoris纯化方法的短的处理时间。
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山崎裕渡边H, K, Kragh-Hansen U,没有试图推高日圆年代,原田K, Suenaga, Otagiri M
体外和体内性质的重组人血清白蛋白毕赤酵母属pastoris纯化方法的短的处理时间。
制药研究》2001年12月,18 (12):1775 - 81。doi: 10.1023 /: 1013391001141。
- PubMed ID
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11785700 (在PubMed]
- 文摘
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目的:重组人血清白蛋白(rHSA),分泌pastoris通过毕赤酵母表达系统,被一个快速和有效的方法,纯化的基本功能强大但可逆的蛋白质绑定到蓝琼脂糖。的结构特性、稳定性和配体结合的属性产生的蛋白质检测,并进行了临床前研究。方法:蛋白质结构是由氨基酸测序,研究钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,CD光谱和色谱法。稳定性是研究由盐酸胍变性量热法,研究了超滤和配体绑定。老鼠实验125标白蛋白。结果:远紫外和近紫外CD光谱rHSA相同的人类血清白蛋白分离血清(HSA)。Mercaptalbumin和non-mercaptalbumin的高效液相色谱分离使用N-methylpyridinium聚合物基列。60%的mercaptalbumin rHSA存在,内容高于商业HSA的准备。脂肪酸,N-acetyl-L-tryptophan和巴氏灭菌有类似对rHSA和HSA的构象稳定性的影响。立体选择配体结合属性(华法林、phenprocoumon pranoprofen和布洛芬)的rHSA HSA的相同。 The effect of the neutral to base transition on warfarin (site I-ligand) and dansylsarcosine (site II-ligand) binding to rHSA was also similar to HSA. In vivo studies showed comparable half-lives, excretion and tissue distributions of the two albumin preparations. CONCLUSION: The present yeast expression system and purification procedure result in rHSA with structural and functional properties very similar to those of HSA.