钙绿-1测定血小板胞浆钙较其他荧光染料的优点。
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李sk，李志勇，李美，钟淑敏，钟俊华
钙绿-1测定血小板胞浆钙较其他荧光染料的优点。
《生物化学》1999年9月10日;273(2):186-91。
- PubMed ID
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10469489 (PubMed视图］
- 摘要
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荧光指示剂由于相对易于使用，被广泛用于多种细胞类型的胞质钙的测量。尽管如此，它们有一些缺陷，在某些条件下无法准确测量，例如显着的染料泄漏和紫外线猝灭效果。甲萘醌是一种具有抗聚集作用的代表性醌类衍生物，也是一种紫外线吸收剂。为了探讨甲萘醌是否能通过激动剂影响血小板胞质钙的变化，我们用钙绿-1测定了血小板胞质钙水平的变化。由于这种染料以前没有在血小板中使用过，我们确定用3微米染料在37℃下孵育60分钟可使绿钙-1达到最佳负载。我们的研究比较了绿钙-1与fura-2和fluo-3(两种广泛使用的染料)在测量细胞质钙时的使用。Fura-2是紫外线激发的，所以当甲萘醌在装载Fura-2的细胞中处理时，它有猝灭效果。另一种可见荧光指示剂氟-3从血小板中泄漏非常迅速，需要使用已知会影响血小板生理反应的阴离子通道阻滞剂。我们的研究表明，使用钙绿-1可以准确地测量胞质钙水平的变化，而没有这些问题。因此，我们能够证明，甲萘醌以剂量依赖的方式抑制凝血酶对钙的增加，类似于甲萘醌在血小板中的抗聚集作用。