结构性因素的抑制剂特异性和选择性PDE2A使用小麦胚芽体外翻译系统。
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Iffland,科尔D,低的年代,烹调的菜肴J,张Y, Kothe M,曹Q, Kamath AV, T叮YH, -艾伦伯格
结构性因素的抑制剂特异性和选择性PDE2A使用小麦胚芽体外翻译系统。
生物化学。2005年6月14日,44 (23):8312 - 25。
- PubMed ID
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15938621 (在PubMed]
- 文摘
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环核苷酸磷酸二酯酶(pde)调制信号的不同过程,如心脏收缩,血小板聚集,脂解作用,肝糖分解,平滑肌收缩。环鸟苷酸(cGMP)刺激人类的磷酸二酯酶2 (PDE2)表达主要在大脑和心脏组织。PDE2A参与调节血压和流体内稳态的心房利钠肽(ANP),使PDE2-type酶药物发现的重要目标。的设计更有效和选择性抑制剂PDE2A治疗心脏病的将大大帮助识别的活性位点残基在PDE2A确定底物和抑制剂的选择性。确定活性位点残基通过传统突变研究涉及耗时且乏味的净化大量从overexpressing细胞突变的蛋白质。我们在这里报告一个替代方法快速生成人类PDE2A和识别他们的酶的活性位点突变体属性使用小麦胚芽体外翻译系统(溶,也称为胞外翻译)。我们还展示了人类PDE2A的催化域的晶体结构决定分辨率1.7,为合理的设计提供了一个框架的活性位点突变体。使用快速诊断方法对人类PDE2A突变体的表达,我们确定了活性部位残留Asp811的角色,Gln812, Ile826, Tyr827 PDE2A抑制剂和底物选择性。