潮霉素B-selected细胞系来自GAL4-regulated pUAST结构。

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引用

Makridou P,伯内特C,兰迪T, Howard K

潮霉素B-selected细胞系来自GAL4-regulated pUAST结构。

《创世纪》,2003年6月,36 (2):83 - 7。

PubMed ID
12820169 (在PubMed
]
文摘

在这里,我们报告的生成稳定、可选择的果蝇S2细胞系使用UAS-GAL4系统。潮霉素抗性基因的克隆到pUAST向量和与其他pUAST cotransfection构造S2细胞导致coexpression多达四个不同的蛋白质在潮霉素的选择。蛋白表达是由无处不在的Actin5C-GAL4司机和细胞培养在hygromycin-supplemented维护,无血清媒体,以确保本构蛋白的生产。视觉细胞比较cotransfected GFP和RFP演示了一个均匀的细胞群同时表达两个标记,而免疫印迹分析显示并发MYC3-tagged蛋白质的表达。此外,荧光细胞排序(流式细胞仪)的分析显示,80%的总细胞群表达GFP标记。我们的数据表明,使用这种技术可以建立稳定的、可选择的细胞系提供的易接近的蛋白质。这有助于蛋白质研究,并破坏需要执行耗时和昂贵的转染。

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