Dihydroorotase从大肠杆菌。替代Co (II)的活性部位锌(II)。
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布朗,柯林斯KD
Dihydroorotase从大肠杆菌。替代Co (II)的活性部位锌(II)。
J生物化学杂志。1991年1月25日,266 (3):1597 - 604。
- PubMed ID
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1671037 (在PubMed]
- 文摘
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治疗大肠杆菌dihydroorotase(亚基分子量为38729)只包含1活性部位锌(II)离子/亚基的巯基试剂N -马来酰亚胺(乙)(NEM)块的两个外部锌(II)网站每单元和大大减少降水引起的高浓度的锌(II);稳定的酶部分与空气氧化和稀释失活;使活性部位锌(II)更容易去除;,并增加kcat降低公里。治疗NEM-blocked dihydroorotase(与螯合剂(NEM) dihydroorotase) 2, 6-pyridinedicarboxylic酸性pH值5.0在缺乏氧气和微量金属离子去除活性部位锌(II)半衰期为15分钟,使得生产毫克的大量适度稳定的“分离”(NEM) dihydroorotase收益率在80%左右。治疗“分离”(NEM) dihydroorotase有限公司(II)在pH值7.0生产(NEM) dihydroorotase完全取代在活性位点有限公司(II)在100%的收益率:分析了0.95 - -1.1 g原子公司每活性部位(II)和0.03 - -0.05 g原子的锌(II) /活性部位。有限公司(II)——(NEM) dihydroorotase活跃在pH值8。公司的电子吸收光谱(II)——(NEM) dihydroorotase pH值6.5牵连到一个活性部位硫醇基为配体的金属离子。频谱是不一致的活性部位的四面体配位金属离子和最符合pentacoordinate结构。