ERK2细胞质保留序列的鉴定。
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鲁宾菲尔德，刘国强，刘国强
ERK2细胞质保留序列的鉴定。
《生物化学杂志》1999年10月22日;274(43):30349-52。
- PubMed ID
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10521408 (PubMed视图]
- 摘要
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丝裂原激活蛋白激酶/细胞外信号响应激酶(ERK)级联信号机制的关键步骤是其转位到核，在那里它调节转录和其他核过程。为了表征ERK2的亚细胞定位，我们将其与表达绿色荧光蛋白(GFP)的基因3'端融合，形成GFP-ERK2蛋白。该结构在CHO细胞中的表达导致GFP-ERK2蛋白的核定位。然而，GFP-ERK2与其上游激活物MEK1的共表达导致GFP-ERK2在细胞质中保留，这是其与MEK1结合的结果，并在刺激后被逆转。然后我们检测了ERK2的c端区域在亚细胞定位中的作用。GFP-ERK2 312-319残基取代丙氨酸残基可阻止ERK2的胞质保留及其与MEK1的结合，但不影响其活性。对细胞质保留最重要的是ERK2的316、319和320位的三个酸性氨基酸。321-327残基取代丙氨酸破坏了ERK2在有丝分裂刺激下的核转位。因此，我们得出结论，ERK2的312-320残基负责其细胞质保留，321-327残基在ERK2核易位机制中发挥作用。