人DNA拓扑异构酶I的cDNA克隆:一个67.7 kda羧基末端片段的催化活性。
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D'Arpa P, Machlin PS, Ratrie H 3, Rothfield NF, Cleveland DW, Earnshaw WC
人DNA拓扑异构酶I的cDNA克隆:一个67.7 kda羧基末端片段的催化活性。
中国科学院学报。1988年4月;85(8):2543-7。
- PubMed ID
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2833744 (PubMed视图］
- 摘要
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从自身免疫抗拓扑异构酶I血清筛选的表达载体文库(lambda gt11)中分离出编码人拓扑异构酶I的cDNA克隆。其中一个克隆被表达为一种融合蛋白，由一段32 kDa的细菌TrpE蛋白片段与cDNA编码的67.7 kDa蛋白相连。三行证据表明克隆的cDNA编码拓扑异构酶i。(i)融合蛋白和人核拓扑异构酶i的蛋白水解图基本相同。(ii)融合蛋白可放松超卷曲DNA，这种活性可由抗拓扑异构酶I血清免疫沉淀。(iii)序列分析显示，最长的cDNA克隆(3645个碱基对)编码了一个含有765个氨基酸的蛋白质，与酿酒酵母拓扑异构酶i的同源性为42%。序列数据还显示，催化活性的677 kda片段由羧基端组成。