人类的肝脏脱氢表雄酮sulfotransferase:互补的分子克隆和表达。
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Otterness DM, Wieben ED、木材TC、沃森工作组,马登BJ,麦考密克DJ,温什波姆RM
人类的肝脏脱氢表雄酮sulfotransferase:互补的分子克隆和表达。
摩尔杂志。1992年5月,41 (5):865 - 72。
- PubMed ID
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1588921 (在PubMed]
- 文摘
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硫酸盐化作用是一个重要的许多激素和药物代谢途径。人类的肝脏特征包含至少三个好sulfotransferase (ST)酶,即。脱氢表雄酮(DHEA)圣,两种形式的苯酚sulfotransferase (PST)。净化我们的目标是,获得部分氨基酸序列,克隆和表达cDNA人类肝脏脱氢表雄酮圣聚合酶链反应引物的基础上设计之间的同源性大鼠肝脏hydroxysteroid圣,老鼠肝脏PST和牛雌激素圣这些引物放大一个独特的人类肝cDNA序列,这聚合酶链反应产物是人类肝cDNA库用于屏幕。两个克隆被孤立,包含相同的开放阅读框架,855个核苷酸,编码285个氨基酸的蛋白。推导的氨基酸序列编码的蛋白质包括两个独立的27 -和23-amino酸序列是相同的那些通过microsequencing纯化的蛋白水解片段人类肝脏脱氢表雄酮圣翻译,在兔网织红细胞溶解产物系统的mRNA转录体外两cDNA克隆导致35-kDa翻译产品comigrated净化人类肝圣在脱氢表雄酮钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳。这翻译的产品也催化脱氢表雄酮的硫酸盐化作用,但不是模型的硫酸盐化作用底物的两种形式的PST发现在人类肝脏。两个cDNA克隆也用于创建表达式构造与真核表达载体P91023 (B),和这些结构被用来使转染COS-1细胞。转染细胞表达高水平的脱氢表雄酮圣的活动,这种酶活性抑制的显示模式圣抑制剂2,6-dichloro-4-nitrophenol相同的人类肝脏脱氢表雄酮圣的cDNA克隆人类这一重要sulfate-conjugating酶将增进了解脱氢表雄酮圣之间的关系和其他人类肝脏STs,圣酶以及其他物种。