谷胱甘肽转移酶动力学特征重组人类T1-1,多态解毒酶。
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Jemth P, Mannervik B
谷胱甘肽转移酶动力学特征重组人类T1-1,多态解毒酶。
拱生物化学Biophys。1997年12月15日,348 (2):247 - 54。
- PubMed ID
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9434735 (在PubMed]
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重组体人θ类谷胱甘肽转移酶T1-1一直不齐的表达在大肠杆菌和一个简单的净化方法涉及固定铁离子亲和色谱法和橙色染料色谱法。酶的催化性质明显的区别于其他谷胱甘肽转移酶,也在θ类,对底物的选择性和动力学参数。(除了1之外,2-epoxy-3) - 4-nitrophenoxy丙烷,先前监控使用的基质酶,人类谷胱甘肽转移酶T1-1与天然phenethylisothiocyanate活动也显示与氢过氧化枯烯谷胱甘肽过氧化物酶活性。此外,4-nitrobenzyl氯和溴化4-nitrophenethyl酶活跃,但没有可检测活动与化学反应1-chloro-2越多,4-dinitrobenzene。谷胱甘肽的米氏常数K (m)谷胱甘肽,与1,2-epoxy-3——(4-nitrophenoxy)丙烷作为第二衬底,在低pH值高,但在较高的pH值降低。这是反映在kcat / K (m)谷胱甘肽增加一个明显的pKa值为9.0,反映了在溶液中电离硫醇基的谷胱甘肽。得到相同的结果与溴化4-nitrophenethyl亲电基板,虽然K (m)谷胱甘肽值在pH值为7.5(0.72毫米),以及pKa(8.1)源自kcat / K对pH值的依赖关系(m)谷胱甘肽,这种基质较低。相比之下,kcat和kcat / K (m)亲电试剂显示最大或高原pH值在7.0 - -7.5,和一个明显的pKa值5.7决心的pH值依赖kcat 4-nitrophenethyl溴和1,2-epoxy-3——(4-nitrophenoxy)丙烷亲电基板。这个pKa值反映了电离enzyme-bound谷胱甘肽,最有可能涉及巯基的pKa价值从而降低酶。三个不同的cDNA序列相比以前公布的被发现。 One of these differences causes a change in the deduced amino acid sequence and involves the nucleotide triplet encoding amino acid 126, which was determined as GAG (Glu), instead of the published GGG (Gly).