定点诱变活性位点预测残留的谷氨酸羧肽酶II。
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Speno HS, Luthi-Carter R, Macias西城,情人节SL, Joshi AR, Coyle JT
定点诱变活性位点预测残留的谷氨酸羧肽酶II。
摩尔杂志。1999年1月;55 (1):179 - 85。
- PubMed ID
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9882712 (在PubMed]
- 文摘
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谷氨酸羧肽酶II (GCP II)催化的胞外水解神经调质N-acetyl-aspartylglutamate N-acetyl-aspartate和谷氨酸。GCP二世也在folylpolyglutamate水解gamma-glutamyl债券。GCP II显示的预测的氨基酸序列相似性从链霉菌属氨基肽酶将proteolyticus弧菌,其晶体结构已经确定。这些氨基肽酶cocatalytic锌metallopeptidases属于家庭M28肽酶。具体提出了锌和底物配体GCP II基于氨基酸序列比对这些M28家庭成员。在目前的研究中,定点诱变被用来测试的分配这些假定的GCP第二配体在人类。替换五个公认的锌配体导致严重降低酶活性,尽管突变蛋白表达为证明了免疫印迹分析。此外,附近的氨基酸替换假定的锌配体已经确认其他特定残留物对酶结构和/或功能很重要。替换少假定的底物配体被扰动,提高公里观察替换推出了大型电荷扰动(如赖氨酸Glu)。替换的结果在拟议中的锌和基质配体符合这些残留的作业和GCP二表明,类似的其他成员肽酶的三维结构家庭M28。