生物活性的结构表征人类lipocortin 1大肠杆菌中表达。
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Arcone R, Arpaia G, Ruoppolo M, Malorni,璞琪P,马里诺克,Ialenti, Di罗莎M, Ciliberto G
生物活性的结构表征人类lipocortin 1大肠杆菌中表达。
欧元。1993 1月15日,211 (2):347 - 55。
- PubMed ID
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8425544 (在PubMed]
- 文摘
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Lipocortin或膜联蛋白1是一个calcium-dependent phospholipid-binding蛋白可能作为糖皮质激素,调节抗炎因子。互补脱氧核糖核酸对人类lipocortin 1是pT7.7克隆表达质粒的控制下诱导噬菌体T7 RNA聚合酶启动子。在与异丙thio-beta-D-galactoside感应,大量蛋白质的产生和累积在大肠杆菌中可溶性形式。重组蛋白的纯化是同质性的两个后续的离子交换色谱步骤。最终的产量大约30 mg / l细菌培养。纯化蛋白的电喷雾质谱分析表明,重组产品对应的本机人类lipocortin 1,没有最初的蛋氨酸和自由氨基丙氨酸;胰蛋白酶的肽图由fast-atom-bombardment质谱分析表明,重组蛋白含有半胱氨酸残基位置与自由硫醇集团263年和324年,而Cys270和Cys343可能是参与一个链内的二硫桥。重组体人lipocortin 1减少了carrageenin-induced爪子水肿在老鼠体内和体外抑制猪胰腺磷脂酶A2活性;在这两种情况下,剂量反应是观察。