化学交联及质谱鉴定网站交互的保险,UreF和脲酶。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Chang Z, Kuchar J, Hausinger RP
化学交联及质谱鉴定网站交互的保险,UreF和脲酶。
J生物化学杂志。2004年4月9日,279(15):15305 - 13所示。Epub 2004年1月28日。
- PubMed ID
-
14749331 (在PubMed]
- 文摘
-
合成的克雷伯氏菌aerogenes脲酶需要四个辅助蛋白质生成,在GTP-dependent过程中,双核的镍活性部位的金属离子桥接carbamylated赖氨酸残留物。外包装和UreF附属与脲酶脱辅基蛋白形成稳定复合物的蛋白质,由尿素、UreB, UreC。的网站使用homobifunctional氨基类属特异性的蛋白质-蛋白质之间的关系进行了探讨与活性化学cross-linkers残留物被matrix-assisted激光desorption-ionization确定飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)胰蛋白酶的肽。UreABCD复杂的研究的基础上,被保险人可以交联与UreB赖氨酸(9),UreB赖氨酸(76),和UreC赖氨酸(401)。此外保险似乎是定位在UreC赖氨酸(515)根据反应性降低的残留较其反应UreD-free脱辅基蛋白。几个UreB-UreC和UreC-UreC交叉连接也被观察到在这个复杂;例如UreB赖氨酸(76)UreC氨基酸,UreB赖氨酸(9)与UreC赖氨酸(20)和UreC赖氨酸(515)与UreC赖氨酸(89)。这些交互是符合这些残留的近似表面位置UreABC晶体结构中观察到。MALDI-TOF女士分析UreABCDF符合UreF氨基酸之间的交联,UreB赖氨酸(76)。意外之间交联的基础上UreB赖氨酸(76)和UreC赖氨酸(382)(远离彼此UreABC结构)以及增加侧链反应为UreC赖氨酸(515)和赖氨酸(522),提出了UreF诱导在脲酶构象的改变,使复位UreB可能会增加镍离子的可访问性和有限公司(2)残留,形成活性部位。