适当的函数11 beta-hydroxysteroid脱氢酶1型内质网腔中依赖其氨基端地区与50-kDa酯酶分享相似的拓扑决定因素。
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弗里克C, Atanasov AG阿诺德•P Ozols J, Odermatt导演
适当的函数11 beta-hydroxysteroid脱氢酶1型内质网腔中依赖其氨基端地区与50-kDa酯酶分享相似的拓扑决定因素。
J生物化学杂志。2004年7月23日,279 (30):31131 - 8。2004年5月19日Epub。
- PubMed ID
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15152005 (在PubMed]
- 文摘
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继而令糖皮质激素,11 beta-hydroxysteroid脱氢酶1型(11 beta-hsd1)施加一个重要pre-receptor功能和目前被认为是一种有前途的治疗目标。此外,11 beta-hsd1 7-ketocholesterol代谢中发挥着潜在的作用。在这里,我们调查的角色氨基端区酶活性和解决11 beta-hsd1取向的相关性进入内质网(ER)腔。先前的研究显示,11 beta-hsd1 50-kDa酯酶的细胞腔的方向/ arylacetamide脱乙酰酶(E3)是由他们的高度相似的氨基端跨膜域。替换赖氨酸(5)通过在11 beta-hsd1爵士,但不是类似的赖氨酸(4)通过在E3 Ile,导致ER膜,一个反向拓扑显示第二个拓扑行列式的存在。这里我们发现Glu (25) / Glu(26)在E3 11 beta-hsd1和Asp(25)作为腔的方向的第二个因素。我们的研究结果表明,特定的残基的确切位置而不是净电荷分布两侧膜螺旋至关重要的拓扑。分析的带电残基的n端结构域显示一个至关重要的角色,赖氨酸(35)/赖氨酸(36)和Glu (25) / Glu(26)酶活性,表明这些残留物负责观察到膜稳定作用的氨基端锚的催化域11 beta-hsd1。此外,活动测量在完整细胞中表达野生型11 beta-hsd1,面对ER腔,或突变速率/转k6,面对细胞质,显示腔的取向是必不可少的高效氧化的皮质醇。此外,我们表明,11 beta-hsd1,但不是突变速率/转k6细胞质取向,催化7-ketocholesterol oxoreduction。 11beta-HSD1 and E3 constructs with cytosolic orientation of their catalytic moiety should prove useful in future studies addressing the physiological function of these proteins.