克隆和测序的互补编码α和β亚基的丙酮酸脱氢酶。
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小池百合子K,太年代,浦田Y, Kagawa Y,小池百合子
克隆和测序的互补编码α和β亚基的丙酮酸脱氢酶。
《美国国家科学院刊S a . 1988年1月,85 (1):41-5。
- PubMed ID
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3422424 (在PubMed]
- 文摘
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α和β亚基的互补编码片段(PDHα和βPDH)人类的丙酮酸脱氢酶(EC 1.2.4.1 PDH)隔绝的海拉细胞cDNA图书馆λgt11 immunoscreening表达载体。噬菌体cDNA片段随后被用来屏幕人包皮成纤维细胞cDNA文库菌落杂交。核苷酸序列分析的阳性克隆质粒(pHPDA和pHPDB)显示1.36个碱基的插入(kb) PDHα和βPDH 1.69 kb之一,分别让我们完整的氨基酸序列预测蛋白质前体和成熟的两个单元。公认的领袖的29个氨基酸残基序列在pHPDA确认,导致392氨基酸残基的前体蛋白(43414)先生363年和一个成熟的蛋白质残基先生(40334)。类似的领袖的30个氨基酸残基序列pHPDB也确认,导致359氨基酸残基的前体蛋白(39046)先生329年和一个成熟的蛋白质残留先生(35911)。NH2-terminal区域的氨基酸序列的人类PDH高度同源的两个子单元与成熟的猪PDH。磷酸化的氨基酸序列的网站确定PDHα的牛和猪的酶也守恒在人类PDHα。污点分析海拉细胞聚(A) + RNA显示一个信使RNA的1.8 kb PDH PDHβα和1.7 kb,分别。PDHα和βPDH的前体蛋白检测到免疫沉淀反应从35 s-labeled翻译系统游离。