使用酵母2台混合动力系统来识别人类上皮细胞蛋白质结合的淋球菌的Opa蛋白质:细胞内的淋球菌通过Opa丙酮酸激酶蛋白结合,要求主机丙酮酸的增长。
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威廉姆斯JM,陈GC,朱镕基L RF休息
使用酵母2台混合动力系统来识别人类上皮细胞蛋白质结合的淋球菌的Opa蛋白质:细胞内的淋球菌通过Opa丙酮酸激酶蛋白结合,要求主机丙酮酸的增长。
摩尔Microbiol。1998年1月,27 (1):171 - 86。
- PubMed ID
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9466265 (在PubMed]
- 文摘
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淋病奈瑟氏菌opacity-associated (Opa)外膜蛋白的蛋白质是一个家庭参与淋球菌的坚持和入侵人体细胞。我们想确定Opa额外角色在感染过程中使用酵母2台混合动力系统来识别人类上皮细胞蛋白质相互作用Opa蛋白质。虽然这个系统被成功应用到识别许多类型的相互作用的蛋白质,它并没有被用来屏幕人类细胞cDNA库绑定合作伙伴的原核外膜蛋白质。因此,我们也感兴趣的探索多功能性酵母2台混合动力系统的识别bacteria-host交互。利用应变F62SF opap34 %作为诱饵,我们筛选的海拉细胞cDNA图书馆Opa-interacting蛋白质(OIPs)。我们确定了五个不同OIPs,指定OIP1-OIP5,其中两个是人类蛋白质同源——甲状腺激素受体相互作用蛋白(TRIP6)和丙酮酸激酶同工酶M2 (PK)。在本文的研究中,我们调查了Opa蛋白质之间的相互作用和PK更多的深度。Opa-PK交互经体外和体内分析独立于酵母2台混合动力系统。大肠杆菌表达从淋球菌的六种不同的Opa蛋白质FA1090所有绑定比Opa-negative PK大肠杆菌在体外绑定化验。使用anti-PK抗体和荧光显微镜,我们表明,人类上皮细胞与细胞内Opa PK硝唑+淋球菌和大肠杆菌表达Opa蛋白质。 Using a mutant of N. gonorrhoeae unable to grow on pyruvate or lactate, it appears that intracellular pyruvate is essential for gonococcal growth and survival. These results suggest a novel mechanism in bacterial pathogenesis, i.e. the requirement for direct molecular interaction with a host metabolic enzyme (PK) for the acquisition of an essential intracellular carbon source and growth substrate (pyruvate). These results demonstrate that the yeast two-hybrid system is a valuable tool for identifying biologically relevant interactions between bacteria and host proteins, providing valuable leads for further investigations into novel mechanisms of bacterial pathogenesis.