用n -甲基吡啶聚合物柱研究n -乙酰- l-半胱氨酸与人血清白蛋白通过混合二硫化物共价结合的动力学。

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原田D,安乐M,福田H,内藤S,原田K,须永A,太久M

用n -甲基吡啶聚合物柱研究n -乙酰- l-半胱氨酸与人血清白蛋白通过混合二硫化物共价结合的动力学。

2004年8月19(4):297-302。doi: 10.2133 / dmpk.19.297。

PubMed ID
15499198 (在PubMed
摘要

研究了n -乙酰- l-半胱氨酸(NAC)与人血清白蛋白(HSA)之间二硫共价键的结合性质。从健康受试者和肾衰患者中纯化的HSA与NAC在缓冲液中孵育,用4VP-EG-Me柱层析分析HSA中唯一游离硫醇的氧化还原状态。尽管发现完整的HSA主要由三种亚型组成:marcapto白蛋白(HMA)、半胱氨酸结合的非巯基白蛋白(HNA(Cys))和进一步氧化的形式(HNA(oxy)),但与NAC孵育后证实了一种新型非巯基白蛋白(HNA(NAC))的形成。有趣的是,NAC迅速将Cys与海航(Cys)分离,而NAC自身与HSA的结合非常缓慢。这些结果表明NAC和HSA之间的相互作用是一个两步的过程。NAC与健康HSA (k(on,NAC))和健康HNA(Cys) (k(off,Cys))的一级结合解离速率常数分别约为0.0032和1.3 (h(-1))。另一方面,肾衰患者HSA表现为HMA降低,HNA(Cys)升高。k(on,NAC)和k(off,Cys)分别为0.0094和0.45 (h(-1)),提示病理状态可能会影响HSA与NAC的结合特性。

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