Transamidase动力学。酰胺酶反应形成的硫醇酯与胺。

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斯坦伯格P,柯蒂斯CG,翼D,通y,信条RB,灰色,罗兰L

Transamidase动力学。酰胺酶反应形成的硫醇酯与胺。

j . 1975年4月,147 (1):155 - 63。

PubMed ID

239698年(在PubMed

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1。(Beta-Phenylpropionylthiocholine和N) - 5-aminopentyl 5-dimethylaminonaphthalene-1-sulphonamide (dansylcadaverine)作为一对水溶性(pH7.5)模型transamidating酶的底物。酰胺的形成可以通过荧光测量后直接通过监测连续提取的水溶性耦合产品,N - (beta-phenylpropionyl) dansylcadaverine,正庚烷。这个过程的稳态动力学glutamine-lysine endo-gamma-glutamyltransferase从人血浆(fibrinoligase,凝血酶和钙离子激活凝血因子十二)和天竺鼠肝脏(肝转谷氨酰胺酶)进行了25度c . 2。与不同的衬底,beta-phenylpropionylthiocholine Lineweaver-Burk情节与不同浓度的dansylcadaverine拦截在横轴上,表明形成酰基酶的速度限制。3所示。功能正常的基础上活跃的网站,kcat。值为1.8(1)和0.9年代(1),分别分析了血浆和肝脏gamma-glutamyltransferase。两种酶显示相同的亲和力第一衬底beta-phenylpropionylthiocholine, Ka 4 * 10 (4) m . 4。利用第二衬底,dansylcadaverine,似乎是一个数量级与肝酶更有效率。 5. N-(5-Amino-3-thiapentyl)-5-dimethylaminonaphthalene-1-sulphonamide (dansylthiacadaverine) could be used instead of dansylcadaverine in the fluorescent kinetic system. 6. Competitive inhibition by a non-fluorescent amine substrate histamine was also evaluated.

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