保守的天门冬氨酸439与结合的氨基酸底物的配合对于Na+与谷氨酸转运体EAAC1的高亲和力结合具有重要意义。

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陶Z，格罗尔C

保守的天门冬氨酸439与结合的氨基酸底物的配合对于Na+与谷氨酸转运体EAAC1的高亲和力结合具有重要意义。

中华医学杂志。2007年4月;29(4):331-44。

PubMed ID

17389249 (PubMed视图

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摘要

神经元谷氨酸转运体EAAC1在其跨膜结构域中含有几个保守的酸性氨基酸，这些氨基酸可能在催化转运和/或共转运/反转运阳离子的结合中起重要作用。在这里，我们研究了这些氨基酸侧链中的三个，谷氨酸373，天门冬氨酸439和天门冬氨酸454的定点突变对转运蛋白功能特性的中和作用。在施加电压、底物或阳离子浓度跳跃后，通过表达eaac1的哺乳动物细胞的全细胞电流记录来分析转运。373和454位中和突变虽然消除了稳态谷氨酸转运，但对Na(+)和谷氨酸结合的动力学和热力学影响不大，说明这两个位置不构成Na(+)和谷氨酸与EAAC1结合的位点。相比之下，D439N突变导致谷氨酸结合转运体形式对Na(+)的表观亲和力降低了约10倍，Na(+)结合速率降低了约2000倍，而与EAAC1(WT)相比，Na(+)与无谷氨酸转运体结合的动力学和热力学几乎没有变化。此外，D439N突变将l-谷氨酸、THA和PDC转化为EAAC1(D439)阴离子电导的瞬时抑制剂，这些物质是野生型阴离子电导的激活底物，而不是l-天冬氨酸。l-谷氨酸对阴离子电导的激活是双相的，这使得我们可以直接分析三种共运输Na(+)离子中的两种结合作为时间和[Na(+)]的函数。该数据可以用D439N突变导致Na(+)结合显著减缓和底物结合EAAC1对Na(+)亲和力降低的模型来解释。我们认为结合的底物控制着Na(+)与转运蛋白相互作用的速率和程度，这取决于439号位置的氨基酸侧链。

引用本文的药物库数据

药物靶点

药物	目标	种类	生物	药理作用	行动
天冬氨酸	兴奋性氨基酸转运蛋白3	蛋白质	人类	未知的	不可用	细节
谷氨酸	兴奋性氨基酸转运蛋白3	蛋白质	人类	未知的	不可用	细节