人肝细胞色素P450 2C19的分离与鉴定:2C19与s -甲苯妥英4'-羟基化的相关性
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Wrighton SA, Stevens JC, Becker GW, VandenBranden M
人肝细胞色素P450 2C19的分离与鉴定:2C19与s -甲苯妥英4'-羟基化的相关性
生物化学学报。1993 10月;306(1):240-5。
- PubMed ID
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8215410 (PubMed视图］
- 摘要
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为了鉴定和表征人肝细胞色素P450的微小形式，对微粒体样品进行免疫印迹分析，使用各种P450s抗体，这些抗体可以识别多种人P450s。四种P450s在人类肝脏微粒体样本的免疫印迹分析中被识别，这些样本是用一种先前被证明特异性识别大鼠2B1/2的抗体开发的。其中3个P450s被鉴定为2A6、2C9/10和2E1，第4个被称为P450UK。2C9/10单克隆抗体除识别2C9/10外，还识别P450UK。为了鉴定P450UK，对其进行纯化并进行氨基末端氨基酸分析。P450UK的氨基末端序列与从编码CYP2C19的cDNA中推导出的序列相同，因此确定P450UK为2C19。用抗2c9 /10抗体进行定量免疫印迹分析，测定14例人肝微粒体样品中2C19的相对水平。这些分析表明，在一个样品中没有检测到2C19，其水平在其余样品中变化了10.5倍。将2C19的水平与多种人肝脏P450s的相对水平和催化活性进行比较。2C19的水平与样品对4'-羟基酸s -甲苯妥因的能力密切相关(r2 = 0.79)。 In summary, this is the first demonstration of the expression of 2C19 at the enzyme level, and the correlation studies suggest that 2C19 plays a role in the 4'-hydroxylation of S-mephenytoin.