胸苷激酶活动扩展到人类脱氧胞苷激酶的催化剧目。
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Hazra年代,萨比尼E,支持年代,康拉德M,李维
胸苷激酶活动扩展到人类脱氧胞苷激酶的催化剧目。
生物化学。2009年2月17日,48 (6):1256 - 63。doi: 10.1021 / bi802062w。
- PubMed ID
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19159229 (在PubMed]
- 文摘
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打捞的核苷在人类细胞的胞质是由脱氧胞苷激酶(dCK)和胸苷激酶1 (TK1)。而TK1只是负责胸苷磷酸化,dCK能够转换为直流,dA, dG一磷酸形式。使用dCK结构数据,我们预测,选择活性位点的突变,除了使酶更快,扩大dCK催化曲目包括胸苷。具体地说,我们假设空间斥力之间的甲基胸腺嘧啶基地和Arg104的主要因素是防止野生型dCK胸苷磷酸化。这里我们提出几个dCK动力学数据变异Arg104已经取代了选择残留物,所有执行结合突变Asp133丙氨酸。我们表明,一些疏水残基在104位置赋予dCK胸苷激酶活动。根据突变的确切性质,酶的底物被修改的偏好。R104M-D133A双突变体pyrimidine-specific酶由于大K与嘌呤(m)值。双突变体的晶体结构在复杂R104M-D133A胸苷供应的l形结构解释的能力,这种变异使胸苷磷酸化和胸苷类似物。Arg104的替换一个较小的残留允许L-dT深入结合活性部位,使空间C5-methyl组的胸腺嘧啶基地。 The unique catalytic properties of several of the mutants make them good candidates for suicide-gene/protein-therapy applications.