作为非特异性羧酸酯酶表生家族成员的视黄醇酯水解酶的纯化与表征。
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Schindler R, Mentlein R, Feldheim W
作为非特异性羧酸酯酶表生家族成员的视黄醇酯水解酶的纯化与表征。
中华生物化学杂志1998 2月1日;251(3):863-73。
- PubMed ID
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9490062 (查看PubMed］
- 摘要
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从猪肝和人肝中分离得到肝视黄醇酯水解酶(REH)，并对其活性进行了表征，并与其他视黄醇酯裂解酶的一些性质进行了比较。序列分析表明，REH蛋白在结构上与非特异性羧酸酯酶相似，与胆盐激活的脂肪酶和胆固醇酯酶不同。猪REH是一种64-kDa的蛋白质，在100 mM Chaps存在下，以595纳摩尔× h(-1) × mg(-1)蛋白质的速度水解棕榈酸视黄酯，棕榈酸视黄酯的表观Km值为27.5微米。pH值为7.0 ~ 9.2。其人体对应物的分子质量为65kda，最佳pH值接近6.5。在Chaps存在的情况下，猪的REH活性被各种非离子洗涤剂刺激高达1.7倍。刺激引起的视黄醇棕榈酸盐裂解的顺序为n-十二烷基葡萄糖苷>辛酰基- n-甲基葡酰胺> n-辛基葡萄糖苷> n-十二烷基麦芽糖苷> Triton X-114 > Triton X-100。α -生育酚和双(4-硝基苯)磷酸[(Np)2P]可有效抑制猪REH。猪REH的结构、免疫和催化特性、pH依赖性以及(Np)2P对酶活性的影响与非特异性羧酸酯酶ES-4的报道相似。然而，ES-4与REH在分子质量和对Chaps或Chaps类洗涤剂作为辅助因子的要求上有所不同。 Judging from these results, pig REH may be a non-specific carboxylesterase isoform.